在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。(一)食管拉网细胞的单细胞悬液的制备(1)将食管拉网...[继续阅读]

    定量细胞荧光染色,要求细胞成分染色均匀,保证染色做到染料分子数与被染的某种参量成一定的量效关系。在流式定量分析中,掌握好荧光染色液的浓度非常重要。为了更好地说明这个问题,可以用下式表示:F=Q(I-εCL)式中:F表示荧光强...[继续阅读]

    (一)细胞破膜剂应用的意义用流式细胞仪检测细胞DNA、内抗原,如与细胞凋亡有关的P53蛋白、Bcl-2蛋白、及细胞内因子IL-4、IFN-γ等,均需要首先使流动的、完整的细胞膜产生可通透抗体的小孔,即所谓的破膜过程。破膜的好坏直接影响荧...[继续阅读]

    溶血,即裂解红细胞是流式细胞术分析白细胞的先决条件。溶血不好,白细胞群不能很好分开。所以,溶血好坏直接影响检测结果。为此,必须对溶红细胞过程进行全面了解并严格控制溶解红细胞的条件。(一)溶解红细胞的基本原理首先...[继续阅读]

    机体免疫状态是衡量机体是否罹患疾病的重要指标,目前多采用流式细胞术来监测机体的免疫状态,其中最重要的指标是检测T、B和NK淋巴细胞的水平。T细胞又主要包括T辅助细胞(Th)和T抑制细胞(Ts)细胞亚群。CD3细胞代表外周血中总的成...[继续阅读]

    (一)双色分析方案CD45-FITC/CD14-PE;CD3-TC-CD4-PE-CD8-FITC;CD3-FITC/CD(16+56)-PE;CD19-TC;Cal-Lyse;ControlIgG2a-FPT。结果见表2-3-1。(二)三色分析方案表2-3-1双色法检测外周血T细胞、B细胞、NK细胞试剂组合管号FITCPE应用12345CD45CD3CD3CD3CD3CD14CD19CD4CD8CD16和CD56光...[继续阅读]

    PI或EB荧光染色方法,目前市场已有试剂盒出售,十分方便;但也可以自行配制试剂。用PI综合染液做细胞DNA含量“一步法”染色:①PI综合染液的配制:生理盐水129.6ml,PI10mg、RNase2mg、1.0%TritonX-1000.5ml、枸橼酸钠200mg、加蒸馏水至200ml,调pH7....[继续阅读]

    (一)DNA倍体分析的理论依据在生物细胞中,DNA含量是恒定的参量,DNA含量随着细胞增殖周期各时相不同而发生变化。G0期细胞被认为是不参与增殖周期循环的一群细胞,即为静止细胞,其细胞为恒定的二倍体DNA含量(2C);G1期细胞具有增殖活...[继续阅读]

    半胱氨酸蛋白酶3(caspases-3)是细胞凋亡信号转导通路中的ICE蛋白酶家族的重要成员,在细胞凋亡发生的早期被激活。ICE家族主要通过两种途径来引起细胞凋亡的发生:①细胞毒T细胞(CTL)活化后大量表达Fas配体(FasL),FasL和靶细胞表面的Fa...[继续阅读]

    正常细胞膜磷脂的分布是不对称的,膜内表面含有带负电的磷脂(如磷脂酰丝氨酸,PS),而膜外表面含有占绝大多数的中性磷脂。在细胞凋亡早期,细胞表面发生变化,细胞膜内部的磷脂酰丝氨酸(PS)迁移到细胞外层表面,巨噬细胞就是通过识...[继续阅读]