安培检测器是在中科院研究生院应化所袁倬斌教授主持下,汇聚电分析化学、分离科学、电子工程、物理、自动化控制和机械加工等方面的专家及技术人员,历时三年多研制而成,广泛应用于生命科学、医药科学、分子生物学、环境科学及单细胞、单分子分析等领域。
工作原理
当被分离的电活性物质流经电极表面时,由于溶液与电极间有电势差,电活性物质就要得到或失去电子,被还原或氧化,因此,溶液和电极间发生电荷转移,形成电流,该电流符合法拉第定律。记录电流随时间的变化,得到电泳谱图。
检测模式
安培检测器最常用的检测模式有离柱检测和柱端检测两种。在离柱检测模式中,分离和检测毛细管间用导线连接消除安培检测系统的分离电压。在端柱检测模式中,用一个微盘电极正对放置于分离毛细管出样口处,而没有任何连接。
安培检测器有许多优点:
①灵敏度高。尽管仅有1%-10%被测定的电活性物质得到转化,但最小检测限可达10^(-9)-10^(-12),且对各类电活性物质灵敏度差别很小。例如,儿茶酚胺的最低检测浓度小于100pmol/L。溶解氧和电极稳定性的问题造成发生还原反应的被测物质的灵敏度较氧化反应低一个数量级。
②选择性高。一般只对电活性物质有响应,适用于电活性物质的痕量测定,而不受非电活性物质的干扰。而且由于每种物质的氧化还原反应电位不同,对于具有不同电极电位的物质,只要在电解池的两极间施加不同的电压,就可控制电极反应,提高选择性。在目前重要的分析领域,如生物、医学、环境等,可测量复杂基体及大量非电活性物质中的痕量活性物质,例如在生物体液和组织匀浆液中的数千种无关组分中,只对几种物质进行选择性检测。
③线性范围宽。一般是! " # 个数量级,有的可达$ 个数量级。
④结构简单。不需要紫外% 可见光检测器的光学元件,造价和使用成本都很低。
⑤检测池体积小,柱外效应较小,噪声低,响应速度快。
安培检测器的测量原理本身也决定了它固有的局限性与不足。
第一,电化学检测器所使用的流动相必须具有导电性。安培检测器采用的流动相中必须有常用浓度范围为0.01mol/L-0.1mol/L 的电解质(如含盐的缓冲液)存在。流动相要有足够高的介电常数,使电解质充分解离。流动相在电极表面呈电化学惰性,工作电压下背景电流小。常用的反相液相色谱的极性溶剂或水溶液流动相和离子色谱的水溶液流动相大多适用于安培检测器。
第二,安培检测器对流动相的流速、温度、pH值等因素的变化比较敏感。
第三,测量还原电流时,流动相中痕量的氧也可能发生电解反应,引起干扰。
第四,由于电极表面可能会发生吸附、催化氧化还原等现象,因此都有一定的寿命。目前还没有一种通用和可靠的方法能使电极表面完全再生,需要经常清洗或更换。
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