纵观历史,几乎没有哪一门科学技术像流式细胞术这样凝结了众多不同学术背景、不同科研领域科学家的心血。从流式细胞术的发明、改进和革新,到今天在各个领域应用的拓展,每一步都是诸如生物学、生物技术、计算机科学、流体...[继续阅读]

    FCM的结构一般分为5部分:①流动室及液流驱动系统;②激光光源及光束成形系统;③光学系统;④信号检测、存贮、显示、分析系统;⑤细胞分选系统。流式细胞仪的结构见图1-2-4。图1-2-4流式细胞仪的光路结构图(一)流动室与液流驱动系...[继续阅读]

    (一)荧光测量灵敏度灵敏度的高低是衡量仪器检测微弱荧光信号的重要指标,一般以能检测到单个微球上最少标有FITC或PE荧光分子数目来表示,一般现在的FCM均可达到600个荧光分子。(二)仪器的分辨率分辨率是衡量仪器测量精度的指标...[继续阅读]

    众所周知,流式细胞仪是通过内置的激光器发射的激光激发荧光染料,通过荧光将488nm或其他波长的光转变为另一波长的光;并通过光电倍增管将光信号转变为电信号,并由计算机统计处理变为可读数据。在流式细胞仪上常用的荧光素有...[继续阅读]

    FCM对单细胞快速进行各种参数分析必须以单细胞为基础,根据各种组织成分的特点可选择不同的分散细胞方法,以期达到单细胞产额高、损伤少的目的。尽管标本制备已形成了标准化的程序,但实际操作中总会出现这样或那样的问题。...[继续阅读]

    正常组织、瘤组织和淋巴结等活检组织以及内镜(胃镜、食管镜等)取材标本,由于材料较少,制备起来比较麻烦。但其制备方法与实体组织基本相似;(1)取材后立即放入盛少许PBS液的青霉素小瓶中;(2)另取一只小烧杯,杯口用300目尼龙网盖...[继续阅读]

    石蜡包埋组织单细胞分散方法的建立,扩大了流式细胞术的应用范围。对大量临床随访资料通过病理包埋组织的流式细胞术分析,可以重新得到深入研究和利用。现将常用的制备石蜡包埋组织单细胞方法介绍如下。(一)实验方法(1)把石...[继续阅读]

    血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血...[继续阅读]

    (一)制备方法(1)无菌抽取骨髓液0.5ml;(2)将骨髓标本滴入含1000U/ml肝素抗凝剂的1mlPBS液中;(3)再加入PBS液稀释至10ml;(4)用吸管吸取5ml稀释骨髓液徐徐加入盛有4ml的人类淋巴细胞分离液液面之上;(5)在以上条件下,骨髓有核细胞分层在PBS-人类...[继续阅读]

    (一)培养细胞的特征一般细胞培养分为悬浮培养和贴壁培养,由于细胞的增殖有可能形成大小不等的细胞团块或连接成片。如果两个或多个细胞粘连在一块或细胞碎片过多都将影响FCM结果,进而导致实验失败。所以,制备合格的培养细胞...[继续阅读]