概述
精子功能检查是指检查精子的运动功能和对宫颈黏液、卵细胞放射冠、透明带及卵细胞膜的穿透力等。其中,精子穿透力是评价精子功能的主要指标之一,检查精子功能对研究精子在体内运行、受精能力以及男性不育的原因有重要价值。
检查前准备
向被检者讲解精液检查的意义,精液采集方法;采集室内必须清洁、安静、无人为干扰;采集标本前禁欲3~7天;采集精液前需排尿,采集后应将精液立即送检;因精子生成日间变动较大,不能仅凭一次检查结果做诊断,一般应间隔1~2周检查一次,连续检查2~3次。
操作方法
1.体内穿透试验
又称性交后试验,接近排卵期性交后2~8小时内检测宫颈黏液中活精子数量,存活率及活运动力,以评价精子对宫颈粘液的穿透能力。
2.体外穿透试验
(1)简化玻片试验:将一滴宫颈黏液置载玻片上,用盖玻片铺平,两片之间的厚度用硅化的玻璃珠控制,在载玻片两侧各滴一滴精液,使与盖玻片边缘接触,借毛细作用将精液移向盖玻片下,使宫颈黏液与精液之间出现清晰的接触界面,37℃环境中孵育30分钟,观察精子的穿透能力。
(2)精子-宫颈黏液接触试验:将精液与近排卵期的宫颈黏液等量混合,室温下作用30分钟,显微镜下计数摆动的精子,求出摆动精子的出现率,并以单独的精液进行镜检作为精子活力的对照。
(3)无透明带仓鼠卵-精子穿透试验:简称精子仓鼠卵穿透试验,其方法为将精子于获能培养液中经37℃培养18~24 小时,使精子获能,再与用胰蛋白酶处理去除透明带的仓鼠卵混合后继续孵育约3小时完成受精过程,然后以相差显微镜检查,计算卵子受精率和受精指数。
临床意义
1.体内穿透试验
正常情况下,取自阴道后穹隆的标本,性交后2~4小时,精子明显减少或死亡;取自宫颈的标本,则可见活动度大的精子,一般大于50个/高倍视野。本试验用于确定是否因精子-宫颈因素引起的不孕,结果异常与宫颈黏液异常、存在抗精子抗体、少精子、精液不液化、逆行射精及性交方法不当等有关。
2.体外穿透试验
(1)简化玻片试验:本试验常带有一定的主观性,因为在平面玻璃上使精液-黏液接触界面的大小和形状完全标准化是不可能的,因而只能定性评价精子-黏液的相互作用。
(2)精子-宫颈黏液接触试验:本试验的目的是检验精液和宫颈黏液内是否存在损害精子运动功能的抗精子抗体及其损害程度。摆动精子的出现率越高,意味着精子不能穿过宫颈黏液,说明抗精子抗体对精子运动功能的损害越重。
(3)无透明带仓鼠卵-精子穿透试验:受精指数为穿透卵细胞的精子总数与卵细胞总数之比,从整体上反映精子穿透力与顶体反应,受精指数越高说明精子受精能力越强;受精率一般不小于10%。本试验可测定被检者精子的获能、顶体反应和对卵细胞的穿透性能,综合反映精子的受精能力,对不育症的诊断有较高的应用价值;人工授精时可选择穿透力较高的精子,成功率较高。