APP 概述
酯酶染色是以酯酶催化底物水解的产物与重氮盐偶联产生沉淀为原理，用重氮偶联法显示血细胞酯酶，对胞质内酶进行定性及反应强度的判断。不同血细胞内含有的酯酶不同，可分为特异性酯酶（SE）和非特异性酯酶（NSE），SE指氯乙酸AS-D萘酚酯酶，NSE可根据pH值分为酸性NSE（酸性α-醋酸萘酚酯酶）、碱性NSE（α-丁酸萘酚酯酶）、中性NSE（α-醋酸萘酚酯酶、醋酸AS-D萘酚酯酶等）。
操作方法
1.固定
根据不同的酯酶配置不同的固定液，将干燥的骨髓涂片置于固定液中固定一段时间，固定后可水洗，去除固定液。常见的固定液有10%甲醛-甲醇固定液、10%甲醛-生理盐水固定液、40%甲醛等。
2.染色
取酯酶对应的底物溶于适当溶剂，并与缓冲液、重氮盐配置成pH合适的作用液，将水洗后的骨髓涂片置于作用液中于37℃环境中作用一段时间，作用后水洗，干燥。
3.复染
用特定染液进行复染，复染后水洗，干燥，进行镜检。常用的复染染液有苏木素染液、甲绿水溶液等。
4.氟化钠抑制试验
在1mL作用液中加入1.5mg氟化钠，其余染色步骤同上，分别油镜计数，计算出抑制前后的阳性率或积分，可计算抑制率。
注意事项
1.α-醋酸萘酚酯酶、醋酸AS-D萘酚酯酶及α-丁酸萘酚酯酶染色需加做氟化钠抑制试验并计算氟化钠抑制率。
2.部分试验对标本片有较高要求，需在取材后及时进行染色。
3.应保证染色时温度的稳定，温度较低时应在37℃温箱内操作，使基质充分溶解。
4.根据胞质内沉淀染色的颜色深度、面积等对反应强度进行判断，可分为阴性、弱阳性、阳性、较强阳性、强阳性等。
正常参考值
1. 氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色
阳性为细胞质中出现红色沉淀。
（1）粒细胞系统：分化差的原始粒细胞呈阴性，分化好的原始粒细胞呈阳性，早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均呈阳性且与成熟程度无关，嗜酸性粒细胞呈阴性或弱阳性，嗜碱性粒细胞呈阳性。
（2）其他细胞：单核细胞系统绝大多数为阴性，个别单核细胞系统为弱阳性；淋巴细胞、浆细胞、巨核细胞、幼红细胞、血小板均为阴性；肥大细胞阳性。
2. 酸性α-醋酸萘酚酯酶染色
阳性为细胞质中出现红色沉淀。
（1）单核细胞系统：呈强阳性。
（2）淋巴细胞系统：T淋巴细胞阳性，B淋巴细胞多为阴性。
（3）其他细胞：粒系细胞、红系细胞、巨核系细胞含量较少。
3. α-醋酸萘酚酯酶染色
阳性为细胞质中棕黑色或灰黑色沉淀。
（1）单核细胞系统：分化差的原单细胞呈阴性，分化好的原单细胞呈较强阳性，幼稚及成熟的单核细胞呈阳性，该阳性反应可被氟化钠抑制。
（2）粒细胞系统：各阶段粒细胞呈阴性反应，少数呈弱阳性，该阳性反应不能被氟化钠抑制。
（3）淋巴细胞系统：各阶段淋巴细胞多数呈阴性反应，少数呈弱阳性，该阳性反应不能被氟化钠抑制。
（4）其他细胞：巨核细胞和血小板呈阳性反应，幼红细胞大多数呈阴性，少数呈弱阳性，且不能被氟化钠抑制；浆细胞呈阴性。
4. 醋酸AS-D萘酚酯酶染色
阳性反应为细胞质内出现蓝色沉淀
（1）粒细胞系统：原粒细胞呈阴性或阳性反应，早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均呈阳性，该反应不能被氟化钠抑制。
（2）单核细胞系统：原单核细胞呈阴性或阳性反应，幼稚单核细胞和单核细胞均呈阳性，该反应可被氟化钠抑制。
（3）淋巴细胞：淋巴细胞呈阴性或弱阳性反应，该阳性反应不能被氟化钠抑制。
（4）红细胞系统：早期幼红细胞可呈阳性反应，随着细胞的成熟阳性反应程度逐渐减弱，该反应不能被氟化钠抑制。
（5）巨核细胞和血小板均呈阳性反应。
5. α-丁酸萘酚酯酶染色
阳性反应为细胞之内出现红色沉淀。
（1）粒细胞系统：各阶段粒细胞均呈阴性反应。
（2）单核细胞系统：分化差的原单细胞呈阴性反应，分化好的原单细胞呈阳性反应，幼稚及成熟的单核细胞呈阳性反应，该阳性反应可被氟化钠抑制。
（3）淋巴细胞系统：淋巴细胞呈阴性或阳性反应。
（4）巨核细胞、幼红细胞、浆细胞呈阴性或弱阳性，组织细胞也可呈弱阳性，但不能被氟化钠抑制。
临床意义
通过不同的酯酶染色可进行急性白血病的鉴别诊断。
1. 氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色
此染色反应特异性强，急性粒细胞白血病的原始粒细胞多呈阳性，急性单核细胞白血病细胞几乎呈阴性；急性淋巴细胞白血病细胞呈阴性，戈谢细胞和曼尼-匹克细胞为阴性，海蓝细胞为阴性或弱阳性，组织嗜碱细胞为阳性，多发性骨髓瘤细胞为阴性。
2. 酸性α-醋酸萘酚酯酶
此染色反应临床上主要用于鉴别T、B淋巴细胞。
（1）鉴别T、B淋巴细胞：成熟T淋巴细胞呈点状颗粒或块状阳性，B淋巴细胞大多呈阴性，偶见稀疏、弥散的细小颗粒。
（2）鉴别急性白血病类型：急性T淋巴细胞白血病常呈点状或块状阳性，急性粒细胞白血病常呈阴性或弱阳性，急性颗粒异常增多的早幼粒细胞白血病呈弥散分布的强阳性，急性单核细胞白血病呈弥散分布的强阳性。
3. α-醋酸萘酚酯酶染色
此染色主要用于辅助鉴别白血病类型。急性单核细胞白血病时，单核细胞多数呈阳性反应，且可被氟化钠抑制，抑制率在50%以上；急性粒细胞白血病时，原粒细胞呈阴性或阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制；急性早幼粒细胞白血病时，早幼粒细胞呈强阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制；急性淋巴细胞白血病时，原始淋巴细胞为阴性反应，急性T细胞型淋巴细胞白血病可见阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制。异常幼红细胞可呈阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制。巨幼细胞呈阳性反应。
4. 醋酸AS-D萘酚酯酶染色
此染色反应主要用于鉴别急性白血病的细胞类型。
急性粒细胞白血病时，原粒细胞可为阳性反应，该反应不能被氟化钠抑制；急性早幼粒细胞白血病时，颗粒异常增多的早幼粒细胞呈阳性，该反应不能被氟化钠抑制；急性单核细胞白血病时，单核系细胞呈阳性反应，并可被氟化钠抑制；急性粒-单细胞白血病时，部分白血病细胞呈阳性，部分阳性反应可被抑制；急性淋巴细胞白血病时，原有淋巴细胞呈弱阳性或阳性，该反应不被氟化钠抑制。
5. α-丁酸萘酚酯酶染色
此染色反应是急性白血病常用的细胞化学染色，其特异性较高。急性单核细胞白血病时，单核系细胞大多数呈阳性反应，该反应能被氟化钠抑制；急性粒细胞白血病时，原粒细胞一般呈阴性反应；急性早幼粒细胞白血病时，早幼粒细胞常呈阴性反应；急性粒-单细胞白血病时，部分白血病细胞呈阳性反应，部分白血病细胞呈阴性反应；急性淋巴细胞白血病时，原始及幼稚淋巴细胞一般呈阴性反应。异常组织细胞也可呈阳性反应，但该阳性反应不能被氟化钠抑制。
