基于293T-Cas9细胞株构建ICP34.5基因敲除的oHSV-1/Ecfp病毒

摘要： 目的 构建稳定表达Cas9蛋白的工具细胞，并利用短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)编辑技术改造1型单纯疱疹病毒(HSV-1),获得ICP34.5基因敲除的oHSV-1/Ecfp重组病毒。方法 利用慢病毒包装体系，将包装Cas9表达质粒的病毒感染HEK293T细胞，然后经嘌呤霉素筛选获得稳定表达Cas9蛋白的293T-Cas9细胞株，通过聚合酶链式反应(PCR)...