见第3章第3节。常用的特异性单克隆抗体有:抗-CD45(白细胞)、抗-CD14(单核/巨噬细胞)、抗-CD11b(中性粒细胞)、抗-CD3(T淋巴细胞)和抗-CD19(B淋巴细胞)。...[继续阅读]

    原理见本章第2节“精液非精子细胞的收集”。可采用荧光染料结合的特异性单克隆抗体标记白细胞表面的分化抗原,利用流式细胞仪对其进行检测。单克隆抗体染色过程如下。(1)试剂:①异硫氰酸荧光素(FITC)或藻红蛋白(PE)结合的单克...[继续阅读]

    1.原理核酸带有磷酸基,其等电点为pH1.5～2.0。当pH值>2.0时,核酸带负电荷,能结合带正电荷的碱性染料苏木精而使胞核呈紫蓝色,伊红为酸性染料,能与细胞质中带正电荷的蛋白质结合,使胞质呈红色。2.试剂(1)苏木精染液的配制:实验室...[继续阅读]

    1.原理瑞氏染料是由酸性染料伊红Y和碱性染料美蓝组成的复合染料。姬姆萨染料是由天青、伊红Y组成的染料。在一定的pH下,染料中有色离子作用于细胞,细胞根据其嗜色特性,选择性地吸附所需染料而着色。2.试剂(1)瑞氏染液:瑞氏染...[继续阅读]

    1.原理同HE染色。不同的是染液中的俾士麦棕为盐基性染料,伊红、亮绿、橙黄等为酸性染料,能与细胞中具有相反电荷的蛋白质结合,而染成各种不同的颜色,从而能区分各种细胞成分。2.试剂(1)EA-50的配制:将伊红Y、俾士麦棕、亮绿SF染...[继续阅读]

    1.原理荧光染料吖啶橙与精子核中双链DNA结合后在荧光显微镜下发出绿色荧光,而与单链DNA结合时发出红色或黄色荧光。双链DNA的精子有授精能力。2.试剂吖啶橙染色液的配制:吖啶橙0.1g加蒸馏水100ml,枸橼酸1.91g加蒸馏水至100ml,Na2HPO4...[继续阅读]

    1.原理死亡的精子因精子膜通透性改变可使伊红Y染料透过精子膜,精子膜内带阳离子的物质可与带有阴离子的酸性伊红Y染料相结合被染成红色。2.试剂伊红Y染液(见本节苏木精-伊红染色法)。3.操作方法取新鲜液化精液1滴,加伊红Y溶液...[继续阅读]

    1.原理中性粒细胞中含有过氧化物酶,它可将双氧水(H2O2)分解,产生新生态氧,使无色的甲苯胺被氧化成蓝色的甲苯胺蓝,后者进而形成棕色物使细胞着色。2.试剂①饱和NH4Cl溶液(250g/L);②5%(V/V)Na2·EDTA的pH6.0磷酸盐缓冲液;③正甲苯胺0.025...[继续阅读]

    (1)采集:精液采集的最好方法是让病人在实验室由本人手淫采集,采精前禁欲24h以上。如果有困难也可用取精器采集。应告诉病人不能用乳胶和塑料制品的避孕套来采集精液,为保证精子的数量和质量,必须用清洗干燥的细口径试管收集...[继续阅读]

    (1)固定方式:常用的固定方式有物理法和化学法两种方法,目前对生物组织和细胞固定的方法常用化学法。其机制是利用化学试剂和细胞内蛋白质发生交联,使蛋白成分凝固稳定,并有保存糖类和脂肪成分,使其保持活体状态下的形态结构...[继续阅读]