显微注射是指在显微镜下,通过毛细注射针,将外源基因或其它物质导入生物细胞的过程。早期显微注射仅限于将外源物质注入体积较大的卵细胞或受精细胞,其中将基因导入受精卵并使之发育成个体的过程称为转基因动物技术。仪器...[继续阅读]

    核基质——中间纤维的整装电镜制样技术细胞骨架与核骨架是近年来新发现的一种细胞内特殊细胞器。大量的研究表明,细胞骨架与细胞运动、分裂、分化等关系密切;而核骨架与细胞内DNA的复制、RNA的转录,乃至基因表达调控等重要...[继续阅读]

    一、一般技术(一)液体配制1.PBS配方1:...[继续阅读]

    一、非酶分离细胞方法(一)机械分离法　适用于较柔软的组织,如脑、肝、脾、淋巴结、胸腺、胚胎组织、肿瘤组织等。1.组织研磨法:操作方法:(1)取消毒的碟皿(直径5～8cm或略大),放入少许Hanks液或PBS;(2)将采取的小块组织先用PBS漂洗去...[继续阅读]

    肝脏灌流分离肝细胞可以获得大量肝细胞,而且存活率高,分离所需时间短,是实验动物肝细胞分离的较好方法。操作程序:1.大鼠或小鼠用乙醚或2%戊巴比妥(腹腔注射60mg/kg体重)麻醉,浸入75%酒精3～5秒,使全身毛皮浸湿,剥离皮肤,将动物固...[继续阅读]

    细胞淘洗法(elutration)首先由P·E·Lindahl于1948年报道,他利用这种装置分离了真核细胞、精子细胞、酵母细胞、艾氏腹水细胞等。直到1973年,Beckman公司生产了JE-6型离心转头后,这种分离系统才广泛地被应用。它适用于单个细胞悬液,也适...[继续阅读]

    由于细胞表面均带有多少不等的电荷,因此在电场中就会向一定的方向泳动,泳动的速度与电荷的多少相关。绝大多数的细胞在生理性pH条件下,其表面带有负电荷。不同种类的细胞带负电荷的密度不同,因此在电场中移动的速度也不相...[继续阅读]

    一、什么是细胞通讯　　器官和组织的细胞与细胞之间存在的细胞膜通道连接结构,称为间隙连接(gapjunctions)。间隙连接广泛存在于动物组织细胞中,是相邻细胞间直接交流细胞质内的信息分子或离子进行通讯的途径。间隙连接介导的...[继续阅读]

    一、基本原理间隙连接通道的内径约为1.5nm,只能允许离子和分子量小于或等于1000道尔顿的分子通过。信号分子和离子在细胞间流动的方向受化学浓度级差的驱动。据此,检查细胞通讯的方法主要有以下3种,即电偶联、细胞代谢协同和...[继续阅读]

    一、抗肿瘤药物研究多数肿瘤细胞通讯减弱或消失,促进间隙连接通讯的药物,如cAMP、维甲酸、钙调蛋白拮抗剂等能抑制肿瘤细胞增殖与其对细胞通讯的促进或改善作用相关。可将药物促进通讯缺陷的肿瘤细胞恢复连接通讯的作用,作...[继续阅读]