20世纪60年代初,人们发现了生物素和卵白素也称抗生素蛋白,具有高度亲和力,反应迅速,也是自然界中具有最强亲和力的物质之一。生物化学家利用这一特点进行某些提取和层析工作已有40年的历史。20世纪70年代又发现,生物素可以和...[继续阅读]

    免疫细胞化学的特异性染色指抗体只与相应的靶抗原决定簇反应,与其他抗原决定簇不起反应,因此组织切片内只有含靶抗原的部位染色才显阳性。理想的免疫组化染色应该只有特异性反应的染色,阳性产物反应强,背景清晰,因而两者能...[继续阅读]

    一、对照的准确设置免疫组化染色结果,有时存在一定的非特异性背景染色。这种染色不是特异性抗体、抗原反应,而是一种由多种原因引起的鱼目混珠的假象。因此必须用对照的方法来证实组织内显示的反应产物,荧光或有色的产物...[继续阅读]

    一、显色底物免疫酶组织化学技术中,由于抗原抗体反应后所形成的复合物本身无色,无法直接观察,因而需借助于某些化学基因的呈色作用,使其得以显示,得以在显微镜下观察。目前用于免疫酶染色的酶主要有辣根过氧化物酶、碱性磷...[继续阅读]

    机体受到抗原刺激后,通过体液免疫应答,B淋巴细胞活化、增殖、分化为浆细胞,由浆细胞合成并分泌的仅与该抗原发生特异性反应的球蛋白,称抗体(antibody)。由于无抗体活性的免疫球蛋白一般很少见,故人们常把抗体与免疫球蛋白等同...[继续阅读]

    [1]王伯沄.病理学技术[M].北京:人民卫生出版社,2000.[2]倪灿荣,马大烈,戴益民.免疫组织化学实验技术及应用[M].北京:化学工业出版社,2006.[3]倪灿荣.免疫组织化学实验新技术及应用[M].北京:北京科学技术出社,1993.[4]SanoK,SekineJ,InokuchiT.En...[继续阅读]

    一、免疫荧光技术的基本原理免疫荧光技术是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素,制成荧光抗体,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检测组织或细胞内的相应抗原(或抗体)。在组织或细胞内形成的抗原抗体...[继续阅读]

    一、荧光色素能够产生荧光并能作为染料的化合物称为荧光色素,荧光色素必须具备吸收激发光的光能并发射荧光,具有吸收一定频率光能的生色团和能产生一定光亮子的荧光团。吸收的光能转变为荧光的百分数称为“荧光效率”。荧...[继续阅读]

    一、标记方法(一)FITC标记抗体的方法当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是赖氨酸的E-氨基与荧光素的硫碳胺键(Thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合...[继续阅读]

    一、直接法这是最简便、快速的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成特异性荧光抗体。直接用于细胞或组织抗原的检查,此法特异性高,其缺点是一种荧光抗体只能检查一种抗原,敏感性较差(图5-11)。但非常实用,应用也广泛,例如...[继续阅读]