高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,简称HPLC)又称高压液相色谱法(highpressureliquidchromatography)、高速液相色谱法(highspeedliquidchromatogra-phy),是液相色谱法的一种,也是色谱法的一个分支。它是在20世纪60年代末,以经典柱色谱法为基...[继续阅读]

    保留值是表示样品中各组分在色谱柱中的停留时间的数值或表示流动相将组分带出色谱柱所需的液体体积。当分离条件一定时,同种物质因分布系数的关系总是具有相同的保留值,故可用来作定性分析的指标。[死时间]又称非保留时间...[继续阅读]

    在平衡状态时组分在固定相与流动相中的浓度之比,用下式表示时:K=CS/CLCS表示组分在固定相中的浓度;CL表示组分在流动相中的浓度。...[继续阅读]

    在色谱平衡状态时,组分在固定相与流动相中的质量比,用下式表示:k′为容量因子,K为分配系数,Vs为组分在固定相中的体积,VR为组分在流动相中的体积,t′R为校正保留时间,t0为死时间。上式反映了色谱柱内有关样品成分的分布状态,一...[继续阅读]

    在对混合物进行分离时,把表示从色谱柱洗脱出来的各成分的分离状态的分离因子称为分离系数(separationfactor),用α值表示。α值代表了二个物质在相同的色谱条件下的分离选择性,可用下式表示:V1、V2分别为化合物A、B的保留体积;k′...[继续阅读]

    理论塔板数(theoreticalplatenumber)是反映物质在固定相和流动相中动力学特性的重要色谱参数,它是代表色谱分离效能的指标。理论塔板数可由下式计算。由峰底宽W=4δ,上式则可写为:也可采用峰半宽Wt/2来计算N:[有效塔板数(N有效)]理论塔...[继续阅读]

    分离度(也称分辨率resolution)是定量描述混合物中相邻两组分在色谱柱中分离效能的主要指标,用Rs表示,Rs值越大,两个相邻色谱峰分离的越好。图1-1所示的色谱图表示相邻的两个化合物A、B的分离状态。图1-1二成分色谱分离图如图1-1所...[继续阅读]

    由图1-4可见增加k′可以提高分离度,但当k′>5,它对Rs的影响就越来越小。k′改变的有效范围以1<k′<5为宜。k′值增加,会使峰的宽度变宽,峰的高度降低,洗脱时间加长。k′的改变可以通过调节流动相的极性来实现,对正相色谱来...[继续阅读]

    改变α是改变后一组分相对前一组分的保留时间。α变大,则峰的间隔相对变大,分离度Rs也增加。α的改变可以选择不同的固定相或流动相来实现。但改变固定相在液相色谱中比较麻烦,如在一个色谱系统中用二根不同固定相的柱子,则...[继续阅读]

    增加N来提高分离度,就是使色谱峰变狭,从而使二个相邻的峰分开。由表1-4可见,N增加一倍,Rs只提高0.4倍。a越小,达到给定的Rs所需要的N数越大,随着a的减小这种趋向越厉害。由此也可说明,适当增加a(如用梯度淋洗)可降低所要求的N(减...[继续阅读]