空白对照即不进行标记的细胞(图2-4)。设置空白对照的目的是确定待测标本的基础荧光阈值或检测染色标记是否有效。因为某些细胞会被激发产生自发荧光,影响结果判断。图2-4空白对照示意图...[继续阅读]

    在前面流式细胞分析技术的基本原理内容中,已经介绍流式补偿调节的原理和基本方法。这里提出补偿对照的概念。所谓补偿对照是指将用于多色流式分析的各种荧光抗体分别与细胞样本反应,逐个进行单色标记,以测定荧光信号的重...[继续阅读]

    流式技术的发展促进了越来越多的荧光染料的研发。传统的荧光染料如FITC、PE、APC、PerCP等在流式细胞术中应用很广。近年来,随着多色流式细胞分析技术特别是六色以上分析的发展,一些新型的荧光染料也逐渐得到应用。激发波长为...[继续阅读]

    荧光抗体主要指各种荧光染料标记的单克隆抗体。流式细胞技术的发展与荧光抗体技术的发展密不可分。既有用同一荧光染料标记针对不同簇分化抗原(CD)的单克隆抗体,也有用不同荧光素标记的针对同一CD分子的单克隆抗体,这为多色...[继续阅读]

    (一)尽量使用直接标记抗体直接标记抗体是指荧光素标记的单克隆或多克隆抗体,一步染色,操作方便,影响因素少,结果准确。(二)根据待测抗原表达量选择荧光染料标记抗体细胞表面和内部的各种抗原表达量并不相同。荧光染料之间的...[继续阅读]

    按照抗原抗体反应的基本特点,抗体与抗原的比例合适才能达到最佳的反应效果。在应用一种新的抗体进行细胞染色时,需要根据信噪比来决定抗体最合适的工作浓度。首先将细胞的浓度固定(一般1×106/管),依据抗体使用说明书建议的...[继续阅读]

    [1]王建中.临床流式细胞术[M].上海:上海科学技术出版社,2005.[2]努纳兹.流式细胞术原理与科研应用简明手册[M].刘秉慈,许增禄,译.北京:化学工业出版社,2005.[3]梁智辉,朱惠芬,陈九武.流式细胞术基本原理与实用技术[M].武汉:华中科技大学...[继续阅读]

    FACSCalibur的开机较简单,做好一些装备的准备工作、预热5min后,就可以进行检测了。(一)开机前准备1.装鞘液打开鞘液筒抽屉,关闭鞘液筒压力阀,去除鞘液筒压力。断开鞘液筒管路连接(白色为液路,蓝色为气路)和液面检测器连接。移去鞘...[继续阅读]

    FACSComp是BD公司自动设置仪器的应用软件,它不仅可通过标准微球(CaliBRITEbeads)来监测仪器的工作状态,还可以为人类外周血淋巴细胞免疫分群的应用提供常规的、自动化的仪器设置。流式细胞仪包含了一些灵敏的光电元件,为了保证实验...[继续阅读]

    CellQuest软件是从流式细胞仪上进行数据获取和分析的通用软件。可通过CellQuest软件对仪器进行调整和设定,同时进行细胞的检测。并且CellQuest软件也是流式细胞仪数据处理系统内的必要软件。因此,熟练掌握CellQuest软件的各项功能非常...[继续阅读]