流式细胞仪(flowcytometer,FCM)是在光电子技术、激光技术、荧光化学、单克隆抗体技术及计算机技术等交叉融合的基础上发展起来的一种先进的生物医学仪器设备。流式细胞术(flowcytometry,FCM)就是利用流式细胞仪对细胞进行快速、多参数...[继续阅读]

    待测标本的细胞悬液,在流式细胞仪精细的液流和压力控制下,受到鞘液的包裹和约束,细胞排成单列由流动池喷嘴高速喷出,形成细胞液柱。当细胞液柱通过流式细胞仪检测区,细胞液柱中的细胞在入射的激光束照射下产生前向散射(f...[继续阅读]

    (一)前向散射(FSC)样本流中的细胞在激光束的照射下会产生散射光,正对着激光方向的散射光信号在前向小角度进行检测,称为前向散射(图1-1)。它的值反映细胞体积的大小。(二)侧向散射(SSC)90°方向的光电倍增管接收到的散射光称为侧...[继续阅读]

    荧光信号是指荧光素分子受到激发后发出的荧光。在流式细胞分析中,经过荧光抗体标记的细胞通过激光照射检测区时,在激光照射下,荧光染料吸收能量发生能量跃迁,也就是荧光染料中的原子核周围电子从基础态轨道跃迁到激发态轨...[继续阅读]

    流式通道包括散射光通道和荧光通道。散射光通道包括前向散射光通道和侧向散射光通道。荧光通道是指检测荧光信号的通道。前向散射光通道和侧向射光通道是分别接收前向散射(FSC)光和侧向散射(SSC)光的通道,可以分别简称为FS...[继续阅读]

    流式细胞术中使用图形化的方式对数据进行显示和分析,其中承载大量细胞参数的图形称为流式图(图1-4)。其中单参数分析的图形表达方式为直方图;对两个以上参数进行分析的图形表达方式可以是散点图、二维等高线图与二维密度图...[继续阅读]

    流式细胞分析中的荧光染色常需要两种或两种以上标记不同荧光素的单克隆抗体或不同染料的荧光素进行多色分析。两种或两种以上荧光素受激发后发出不同波长的荧光,理论上可以通过分光镜和滤光片等方式将不同波长的荧光之间...[继续阅读]

    流式细胞分析的对象主要是细胞和微球。但是实际上流式细胞分析的标本中可能或多或少含有细胞碎片或其他颗粒性物质,它们也会被流式细胞仪检测到,从而影响目标细胞或微球的分析结果。流式细胞术可以通过设定阈值的方法将细...[继续阅读]

    每一个流式通道都有自己特定的光电倍增管,而每一个光电倍增管的电压都是分别调控的,因此流式细胞分析需要用到多少检测通道,就需要相应设定多少个光电倍增管的电压。如FITC、PE两种荧光抗体标记细胞的流式分析中需要预先分...[继续阅读]

    前面已经介绍光谱重叠与荧光补偿的概念。光谱重叠会导致不同荧光通道之间的信号干扰,流式细胞术通过调节各个荧光通道之间的补偿将干扰信号减去,保证流式分析结果的正确。调节补偿是流式细胞分析的一项基本要求。不同的流...[继续阅读]