在受到凋亡诱导后,线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)会发生变化,导致膜穿透性的改变。有些染料可检测线粒体MMP的变化。其中常用的阳离子绿色荧光染料罗丹明123(rhodamine123,Rh123)可在正常活细胞的线粒体内聚集。当细胞MMP降...[继续阅读]

    TdT介导的dUTP缺口末端标记法(TdTmediated-dUTPnickendlabelling,TUNEL)是1992年Gavricli等首先报道,它实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反映细胞凋亡最典型的生物化学和形...[继续阅读]

    细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上可发生一系列特征性改变,包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等。由于核的改变造成各种荧光染料对凋亡细胞的DNA可染性发生改变,细胞凋亡时,核酸内切...[继续阅读]

    (1)Fas/FasL(Fas配体):Fas抗原与Fas配体的交联是淋巴细胞诱导靶细胞凋亡所必需的途径,它们的异常与免疫相关疾病、肿瘤、移植物排斥、病毒性肝炎、肾小球肾炎等多种疾病高度相关。(2)p53:p53是细胞周期中的“检查点”分子,其控制着细...[继续阅读]

    全血法荧光单标记可检测血小板CD62p、CD63、CD42b、CD41、CD61等指标。具体染色方法步骤如下:(1)采血用枸橼酸盐或EDTA抗凝;(2)10μl荧光标记抗体,加100μlPBS,再加5μl全血(样品管);10μl抗体同型对照,加100μlPBS,再加5μl全血(对照管);轻轻混匀...[继续阅读]

    血小板RNA含量与血小板生成状态相关,他可以区分是因为骨髓抑制或外周血破坏增加引起的血小板减少。在化疗后或移植后,网织血小板可以监测巨核细胞和血小板生成状态。(一)网织血小板检测原理噻唑橙(thiazolorange,TO)是一种亲脂性...[继续阅读]

    一种能够通过胎盘、存在于血小板表面的免疫球蛋白,被称为血小板相关抗体(PA-IgG)。PA-IgG包括3种成分:①真正的抗血小板抗体;②循环免疫复合物;③非特异性吸附于血小板表面的血浆免疫球蛋白。已经确认,PA-IgG和原发性血小板减少性...[继续阅读]

    活化血小板表面会出现一些新的标记。主要的有两个:PAC-1(活化的Ⅱb/Ⅲa)和CD62p(P-selectin),它们是对临床有用的活化血小板标记。此外还有CD31(PECAM)和CD63(lysosomalantigen)两个活化标记,并已在临床应用。血小板活化研究的全血标本收集要...[继续阅读]

    (一)抗体的选择选择CDWorkshop中的单克隆抗体。单克隆抗体反应特异性高,非特异性结合少,但由于血小板富含FcRⅡ(CD32,FcⅡ受体),而Fc受体对不同抗体亚类具有不同亲和力,所以在亚类选择上,对于人的抗体以选择IgG1为好。(二)抗凝剂的选...[继续阅读]

    (一)“米兰”方案第一个广泛应用的干细胞计数方案是由IstitutoNazionaleTumoriinMilan的Siena等人创立的米兰方案(MilanProtocol)。在此方案中,需准备3管50μl的血样或白细胞采集物样本(如白细胞计数小于150μl,如受者样本,则样本和抗体均需加倍...[继续阅读]