层析是用于蛋白质分离纯化的重要技术手段。它是基于固定相(层析介质)对流动相(蛋白质溶液)中各组分阻滞能力大小不同而实现对各组分的分离。按照蛋白质的理化性质不同而实现分离的层析包括:(1) 根据蛋白质所带电荷不同而分...[继续阅读]

    为了研究某一特定蛋白的功能,或是利用该特定蛋白研究其他基因的功能,需要将该蛋白在体外表达出来。将该蛋白的编码DNA 序列扩增出来,然后应用酶学的办法将该目的片段和表达载体DNA 片段连接,组装成一个新的DNA 分子,再用适当的...[继续阅读]

    蛋白质的定性分析是指确定样本中是否有蛋白质存在,以及存在的是何种蛋白质。蛋白质定量分析是确定样本中总蛋白含量或某一单一蛋白含量。蛋白质是由许多氨基酸通过肽键连接构成的生物大分子,氨基酸、肽键、蛋白质的组成特...[继续阅读]

    蛋白质相互作用及通过相互作用而形成的蛋白质复合物是细胞行使各种基本功能的主要承担者,几乎所有重要的生命活动,包括DNA 复制与转录、蛋白质合成与分泌、信号转导和代谢等都离不开蛋白之间的相互作用。常用的蛋白质相互...[继续阅读]

    激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy ,CLSM)是20世纪80年代中期在显微分光光度计和流式细胞仪的基础上发展起来的一种以光学为基础,融机械、电子、计算机为一体的高精度现代化新型显微测试仪器,它脱离了传统光学显...[继续阅读]

    基因是遗传信息的载体,而生命活动、表观形状的体现等是由基因的编码产物——蛋白质所执行。越来越多的证据表明,基因表达和蛋白质丰度及蛋白质功能之间的相关性不完全一致,为了在一个样本中平行检测多种蛋白表达及功能信...[继续阅读]

    DNA 重组质粒是分子克隆的一类,而分子克隆和聚合酶链反应(polymerase chain reaction ,PCR)是两种广泛用于复制特定DNA 序列的方法。DNA 重组系在体外将外源目的基因插入载体DNA ,载体一般来源于质粒或病毒,重组形成一个具有自我复制能力...[继续阅读]

    基因转录是指以DNA 的一条链为模板,按照碱基互补配对的原则,在RNA 聚合酶复合物的作用下合成RNA 的过程,是基因表达过程中的重要环节(彩图4-2-1) 。基因的转录水平受到机体精细的调控,过程复杂,涉及多个生物学过程。机体重要生物...[继续阅读]

    人类基因组计划的完成和人类单倍型计划的实施,使得人类基因组中以单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism ,SNP)为主的多种分子遗传标记不断地被发现报道。随着分子生物学和分子遗传学检测技术日新月异的发展,近年来的研究发...[继续阅读]

    RNA 干扰(RNA interfering ,RNAi)是指由与靶基因序列同源的双链RNA (doublestranded RNA ,dsRNA)引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。其通过细胞中的核糖核酸酶Ⅲ 家族成员之一的dsRNA 特异性核酸酶Dicer 将dsRNA 裂解成由...[继续阅读]