目前常用的检测技术有Southern印迹杂交、聚合酶链式反应(PCR)扩增及在PCR技术基础上发展起来的其他检测方法。Southern印迹杂交Southern印迹杂交是由Korsmeyer等人在1981年发明的一项检测技术,并于1983年被应用于淋巴细胞基因重排的检测...[继续阅读]

    尽管PCR技术是当前检测淋巴组织基因重排的主要方法,但由于PCR技术的高灵敏性,容易出现假阳性。同时由于Ig和TCR重排基因的广谱性,使得有限引物进行扩增时容易出现假阴性。再者,石蜡包埋组织等DNA降解,也容易导致假阴性的出现。...[继续阅读]

    ▲几乎所有类型的淋巴瘤都有染色体异常。与癌不同的是,NHL常存在频发性、非随机性细胞遗传学异常,尤其染色体易位,与临床表现、组织病理学和免疫表型密切相关。▲应用传统的细胞遗传学分析(核型分析)和分子细胞遗传学分析...[继续阅读]

    两个核酸分子碱基序列互补,就可在适宜条件下形成稳定的杂交分子。FISH就是利用这一原理将标记探针(标记了生物素、地高辛或荧光素)与组织、细胞核或染色体DNA(玻片上的标本)进行杂交,经荧光检测系统观察荧光信号在染色体上的...[继续阅读]

    其基本操作步骤可概括为标本制作与预处理→标记探针→将探针与待检标本靶序列杂交→杂交结果检测。▲检测时可先将组织固定到显微载玻片上,并对靶组织进行各种预处理,如用蛋白酶消化去除蛋白,常能增加结果信号强度。▲杂...[继续阅读]

    以检测t(14;18)染色体易位为例具体说明。石蜡包埋组织提取细胞核▲首先对组织块切片后进行HE染色,在显微镜下确定肿瘤细胞密集的部位,切20μm厚石蜡切片,对照HE切片利用显微切割仪将肿瘤周围正常组织和坏死组织切除。▲将石蜡切...[继续阅读]

    4.5.1淋巴瘤染色体异常▲淋巴细胞从原始的胚系构型到分化成熟,其抗原受体(Ig和TCR)基因通过基因重排而形成有功能的基因。▲一个B淋巴细胞或其克隆性后代,均只含一种独特的分子遗传学标记,一旦某一克隆的淋巴细胞发生恶性变化...[继续阅读]

    ▲目前可用于淋巴瘤的DNAFISH商品化探针有CCND1/IgHt(11q13;14q32),C-MYC/IgHt(8q24;14q32),ALK(2p23),BCL2/IgHt(14q32;18q21),BCL6(3q27),IgH等。▲相关染色体异常检测。(表2-2)表2-2FISH商品化探针及相关染色体异常检测淋巴瘤类型染色体易位基因探针类型AL...[继续阅读]

    流式细胞技术是对流式单个细胞及微粒进行检测的技术。尽管被称为流式细胞仪,但实际上,流式细胞仪不仅可以处理细胞,也可以处理染色体、分子、乳胶微球或许多其他能在液体中悬浮的颗粒。因此,流式细胞仪可广义地定义为:能检...[继续阅读]

    流式细胞技术的优点在诊断性血液病理学方面,流式细胞技术的主要优点有:▲区别良性增生与恶性淋巴瘤及淋巴瘤的亚型分类。▲结果快速。▲通过检测细胞的大小(FSC)和颗粒性(SSC),可以确定不同的细胞群体。▲通过设门可以将死细...[继续阅读]