1.1 直接镜检常用器械和材料

    临床标本的直接显微镜检查是最简单和最常用的实验室诊断方法,具有简便、快速的优点。直接显微镜检查所需的器械和工具包括:光学显微镜/荧光显微镜,无菌连柄取样刀、无齿镊子、小剪刀、柳叶刮刀、一次性无菌手术刀片、粉刺......查看详细>>

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1 取材方法

    (1)刮取法收集皮屑、甲屑等标本时可用无菌取样刀从皮损的活动边缘刮取,然后将收集的标本置于载玻片上,滴加一滴浮载液,酒精灯稍加热后,盖上盖玻片,轻加压后在显微镜下观察真菌菌丝和孢子(图1-2-1)。(2)拔取法收集病变头发标本......查看详细>>

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2 不同标本的采集

    (1)皮肤、甲标本采集前先用75%酒精消毒病变部位皮肤或病甲,选择病灶活动边缘,以无菌取样刀刮取皮屑或甲屑。刮取皮肤标本多选用钝刃的无菌连柄取样刀,刮取坚硬厚层的甲标本可选用锐利尖细的柳叶刮刀,以不出血为度。若采集水......查看详细>>

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3 标本的运送

    所有临床标本在采集后应尽快送检,置于无菌的容器里转运,最好在1~2h内进行真菌直接镜检。若需邮寄标本,应将标本置于密封的商品化黑纸盒或容器中,封入塑料密封袋里以防破裂,并详细标记标本相关信息(图1-2-5,1-2-6)。若考虑为粗......查看详细>>

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1 直接镜检步骤

    将临床标本置于载玻片上,滴加1~2滴浮载液,盖上盖玻片,放置片刻或在酒精灯上微加热(火焰上快速过2~3次),加速角质溶解,但勿使沸腾,以免结晶。然后,轻压盖玻片,驱逐气泡并将标本进一步压薄,用滤纸吸取周围溢液,置显微镜下检查......查看详细>>

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2 氢氧化钾法

    氢氧化钾法为临床直接镜检最常使用的方法。氢氧化钾能消化角蛋白并能清除标本中的脓细胞及其他杂质成分,而短时间内不破坏真菌菌丝和孢子。一般使用浓度为10%~20%,如检查角质层较厚甲屑、毛发等标本时可用20%的氢氧化钾(图......查看详细>>

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3 乳酸酚棉蓝法

    乳酸酚棉蓝是真菌镜检的标准浮载液。乳酸可杀灭真菌,棉蓝可使真菌着色,而甘油是常用封固液,可使涂片保存相当的时间(图1-3-3)。本方法适用于大部分真菌标本的检测,常用于真菌培养后镜下观察。图1-3-3 乳酸酚棉蓝法......查看详细>>

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4 钙荧光白染色

    钙荧光增白剂可与真菌细胞壁的β-多糖成分(例如几丁质、纤维素等)非特异性结合,在荧光显微镜的紫外光激发下呈现亮蓝色,易于辨认。钙荧光白染色是近年来临床常用的检测真菌方法。商品化的真菌荧光染色试剂是一种含有荧光素......查看详细>>

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5 墨汁法

    墨汁法主要用于检测隐球菌。因墨汁不能使隐球菌的荚膜着色,在黑色背景下荚膜更透亮,易于辨认。颗粒细而均匀的墨水皆可选择,以印度墨汁效果最佳(图1-3-5)。值得注意的是,人体细胞成分、滑石粉、气泡等可在墨汁表现光环效应......查看详细>>

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6 派克墨水氢氧化钾法

    此法是国际通用的马拉色菌染色方法。KOH能消化角蛋白和杂质,派克墨水可使马拉色菌呈深蓝色。染色时间为10min,染色时间越长,效果越好(图1-3-6)。图1-3-6 派克墨水氢氧化钾法......查看详细>>

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