一、材料的选择实验材料的选择主要依据待分离制备的生物大分子物质的含量和性质而定。一般来说,动物或人体组织中的有效成分含量较低,如胰脏组织中胰岛素的含量极低,含量小于其鲜重的百万分之一;肿瘤组织中微小RNA (microRN...[继续阅读]

    细胞是生物体结构和功能的基本单位。就真核生物而言,细胞除了有细胞膜、细胞质和细胞核外,还有线粒体、溶酶体和内质网等细胞器。除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外,对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物...[继续阅读]

    抽提通常是指在分离纯化之前将经过预处理或破碎的细胞置于溶剂中,使被分离的生物大分子充分释放到溶剂中,并尽可能保持原来的天然状态不丢失生物活性的过程。这一过程是将目的产物与细胞中其他化合物和生物大分子分离,即...[继续阅读]

    一般粗提液的体积都比较大,应经过进一步浓缩和分离纯化处理。常用的浓缩和纯化方法和技术有沉淀法(包括盐析、有机溶剂沉淀、选择性沉淀等)、透析、超过滤、冷冻干燥、离心、吸附层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和...[继续阅读]

    生物大分子制成品的正确保存极为重要,一旦保存不当,造成样品失活、变性、变质,将会使前面的全部制备工作化为乌有,前功尽弃,损失惨重。影响生物大分子样品保存的主要因素有:(1)空气:空气的影响主要是潮解、微生物污染和自动...[继续阅读]

    生物大分子制备方案是在分离纯化过程中几种方法联合使用的总称,它是以达到样品纯化目的为前提的。制备方案设计合理,就能达到事半功倍的效果。本节主要讨论生物大分子制备方案的设计和评价。一、方案设计鉴于样品制备方案...[继续阅读]

    一、离心基本原理当含有细小颗粒的悬浮液静置不动时,重力场的作用使得悬浮的颗粒逐渐下沉。粒子越重,下沉越快,反之密度比液体小的粒子就会上浮。微粒在重力场下移动的速度不仅与微粒的大小、形态和密度有关,而且与重力场...[继续阅读]

    离心机可分为工业用离心机和实验用离心机。实验用离心机又分为制备型离心机和分析型离心机。制备型离心机主要用于分离各种生物材料,每次分离的样品容量比较大;分析型离心机一般都带有光学系统,主要用于研究纯的生物大分...[继续阅读]

    差速离心是指低速与高速离心交替进行,使各种沉降系数不同的颗粒先后沉淀下来,达到分离的目的。沉降系数差别在一个或几个数量级的颗粒,可以用此法分离。样品离心时,在同一离心条件下,沉降速度不同,通过不断增加相对离心力...[继续阅读]

    密度梯度离心法又称为区带离心法,它是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定的离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。此法的优点是:①分离效果好,可一次获得较纯颗粒;②适...[继续阅读]