一、基本原理由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成。随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶H降解,留下互...[继续阅读]

    一、基本原理常规PCR是对终产物进行定量和定性分析,而定量PCR(quantitative PCR,QPCR)是对扩增反应中每一个循环的产物进行定量和定性分析。广义概念的QPCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起...[继续阅读]

    一、基本原理DNA甲基化是指CpG二核苷酸中的胞嘧啶第5位碳原子被甲基化。DNA甲基化是一种基因外修饰,不改变DNA的一级结构;它在细胞正常发育、基因表达模式以及基因组稳定性中起着至关重要的作用。全基因组低甲基化,维持甲基化...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 掌握从牛奶中分离酪蛋白的基本原理和操作方法。2. 了解蛋白质等电点的性质和应用。二、基本原理牛奶中含丰富的蛋白质,其中主要是酪蛋白。蛋白质在其等电点pI溶液中溶解度最低。据此原理,将牛奶的pH调至4...[继续阅读]

    蛋白质的定量分析是生物化学和其他生命学科最常涉及的分析内容。蛋白质测定的方法很多(见表10-1),需要在了解各种方法的基础上根据不同情况选用恰当的方法,以满足不同的要求。下面介绍Folin-酚试剂法、紫外分光光度法、考马斯...[继续阅读]

    蛋白质是两性电解质。在pH值小于其等电点的溶液中,蛋白质带正电荷,在电场中向阴极移动;在pH值大于其等电点的溶液中,蛋白质带负电荷,在电场中向阳极移动。血清中含有数种蛋白质,它们所具有的可解离基团不同,在同一pH的溶液中...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 掌握SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理。2. 了解垂直板电泳的操作方法。二、基本原理SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进十二烷基磺酸钠(SDS)。SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 了解离子交换层析的工作原理及操作技术。2. 学会用离子交换层析法分离混合氨基酸。二、基本原理离子交换层析是利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间亲和力的不同,经过交换平衡达...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 掌握从人外周血中提取、分离和纯化基因组DNA的基本原理和操作方法。2. 了解人体基因组DNA的特点与用途。二、基本原理人基因组由30亿对碱基组成,它包括单倍体细胞中的全部基因。基因不仅可以通过复制把遗传...[继续阅读]

    一、目的和要求1. 掌握从动物中提取、分离和纯化RNA的基本原理和操作方法。2. 了解RNA的生物学特性及其在研究中的应用。二、基本原理细胞内大部分RNA均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA与蛋白质...[继续阅读]