脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)是由许多脱氧核苷酸以3,5-磷酸二酯键连接成线性多聚核苷酸的生物大分子化合物,分子质量至少在几千道尔顿。DNA是生命的最基本物质之一,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。DNA分子的功能是...[继续阅读]

    2.1.2.1STR遗传标记序列1981年,Miesfeld等在人δ和β珠蛋白基因之间发现一类[TG]n组成的双核苷酸重复序列。1989年,Litt和Weber等在研究心肌肌动蛋白基因时,也发现[CA]n二碱基为核心序列的串联重复。同年,Edwards等应用测序方法分析“自毁容...[继续阅读]

    STR自动分型技术广泛应用于法医DNA实验室,具有自动化程度高、快速、灵敏、准确、稳定、重复性好等特点。联合采用多重复合扩增反应、毛细管电泳和荧光检测,可以得到十几个到几十个STR基因座的分型信息。STR自动分型技术的核心...[继续阅读]

    2.2.1.1DNA聚合酶的发现1957年,ArthurKornberg等从大肠杆菌中分离出了一种以DNA为模板催化单核苷酸聚合的酶,称之为Kornberg酶。它是由单一多肽组成的球蛋白,相对分子量为103kD。Kornberg酶后被证实为DNA聚合酶Ⅰ。DNA聚合酶Ⅰ可被枯草杆菌蛋...[继续阅读]

    随着PCR技术的发展,先后出现了一些问题,如非特异性扩增产物的出现,引物二聚体的形成,甚至凝胶电泳上无扩增带。这些问题的产生限制了PCR技术的应用。热启动PCR技术的问世解决了这些问题,使PCR技术更加完美。2.2.2.1热启动PCR的产...[继续阅读]

    2.2.3.1所需化学试剂及配制热启动耐高温DNA聚合酶制备时所需的化学试剂及其配制方法如表2-2。表2-2热启动耐高温DNA聚合酶制备所需化学试剂及配制方法续表2-22.2.3.2耐高温TaqDNA聚合酶的制备1.酶蛋白表达(1)取出菌种,将少许的冰冻菌种...[继续阅读]

    2.3.1.1有机荧光染料概述近年来,随着有机合成技术的不断进步,有机荧光染料也迎来了发展的黄金时代,多种多样的有机荧光染料从实验室走向工业和民用的多个领域,发挥着越来越重要的作用,如电致发光显示屏、化学发光和电化学发...[继续阅读]

    2.3.2.1荧光共振能量转移机理荧光共振能量转移(Frsterresonanceenergytransfer,FRET)是指当其中一个荧光基团(能量供体)处于激发状态时,会将其能量转移给相邻的分子(能量受体),从而引起能量受体的激发,实现能量由供体向邻近的受体转移的...[继续阅读]

    法医DNA荧光检测试剂盒,由于其对多重PCR扩增灵敏性、均一性、保真性的严苛要求,引物的荧光标记以及规模化高纯度的荧光标记引物的分离成为制约该试剂盒高质量、规模化生产的最重要的因素之一。由于全自动DNA合成仪的广泛推广...[继续阅读]

    2.4.1.1基因座选择和排布从法医学个体识别和亲缘鉴定的实用性考虑,选择STR基因座的基本条件包括两方面的要求,即多态性程度和扩增的稳定性。理想的基因座应具备以下几个条件:a.等位基因长度在500bp以下。b.重复单位为三核苷酸以...[继续阅读]