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发育生物学实验 共有 50 个词条内容

实验四十一 利用基因过表达技术研究植物的基因功能

    实验目的1.理解基因过表达技术的原理。2.掌握基因过表达技术的实验方法。实验原理基因过表达的基本原理是通过人工构建的方式在目的基因上游加入调控元件,使基因可以在人为控制的条件下实现大量转录和翻译,从而实现基因产...[继续阅读]

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实验四十二 农杆菌介导的基因沉默技术

    实验目的1.理解RNAi技术诱导植物基因沉默的原理。2.掌握RNAi技术诱导植物基因沉默的实验方法。实验原理基因沉默是迄今为止应用最为广泛的反向遗传学方法,它可以在转录水平(Tran.scriptional Gene Silencing,TGS)和转录后水平(Post-Transcri...[继续阅读]

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实验四十三 酵母双杂实验

    实验目的1.理解酵母双杂的原理。2.掌握酵母双杂的实验方法。实验原理酵母双杂交系统(Yeast-two-hybrid system)利用了真核生物转录调控因子的组件式结构特征,这些蛋白质往往由两个或两个以上相互独立的结构域构成,其中DNA结合结构域...[继续阅读]

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附录1 缓冲液的配制

    1.0.2 mol/L磷酸钠缓冲液(PB,pH 5.8~8.0)(附表1)A液:0.2 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4相对分子量为141.98,2.840 g加d H2O至100mL;Na2HPO4·2H2O相对分子量为178.05;3.561 g加dH2O至100 mL;Na2HPO4·12H2O相对分子量为358.22,7.164 g加dH2O至100 mL)B液:0.2 mol/L磷酸二氢钠(NaH2P...[继续阅读]

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附录2 常用固定液的配制

    1.福尔马林-醋酸-乙醇固定液(FAA)(配方见附表15)附表15 福尔马林-醋酸-乙醇固定液(FAA)配方幼嫩材料用50%乙醇代替70%乙醇,可防止材料收缩。若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。久置时另加入5 mL甘...[继续阅读]

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附录3 常用生理盐水溶液的配制

    1.各种动物所需生理盐水(附表26)附表26 各种动物所需生理盐水的浓度2.几种生理盐水的配制(附表27)附表27 几种生理盐水的配方...[继续阅读]

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附录4 常用粘片剂的配制

    1.铬矾-明胶粘片剂铬矾(硫酸铬钾)0.5 g,明胶5 g,ddH2O至1000 mL。先在烧杯中加热溶解明胶(温度过高会使明胶烧糊,应边加热边搅拌),再加入铬矾,包被玻片时控制水温在70 ℃(水浴锅),如有明显残渣,过滤后使用。2.0.5%多聚赖氨酸(PLL)粘片剂储...[继续阅读]

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附录5 常用染料的配制

    1.苏木精(1)铁钒苏木精甲液(媒染剂):硫酸铁铵(铁钒) 2~4 g蒸馏水 100 mL必须保持新鲜,最好临用前配制。乙液(染色剂):苏木精 0.5 g95%乙醇 10 mL重蒸馏水 90 mL将苏木精先溶于10 ml 95%乙醇中,慢慢倒入重蒸馏水中,瓶口用纱布扎紧置于有光处...[继续阅读]

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附录6 常用显色液配制

    1.DAB/H2O2显色液DAB(3-3-二氨基联苯胺-4盐酸盐) 50 mg0.05 mol/L Tris-HCl(pH 7.6) 100 mL30% H2O2 30~40 μL先以少量0.05 mol/L Tris-HCl(pH7.6)溶解DAB,然后加入余量Tris-HCl,充分摇匀,使DAB的终浓度为0.05%,过滤后显色前加入30~40 μL 30% H2O2,使其终浓度为0.01%。...[继续阅读]

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附录7 常用封片剂的配制

    1.DPX封片剂邻苯二甲酸二甲酯 5 mL二甲苯 35 mL聚苯乙烯 10 g混合后不断搅拌,大约2 h后即可完全溶解。2.甘油胶冻明胶 5 g(1份)蒸馏水 30 mL(6份)甘油 35 mL(7份)石炭酸 0.5 g甘油冻胶为半永久性片子的含水封片剂。先将1份质量较高的明胶溶解...[继续阅读]

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