1.1 引言

    细胞培养液或发酵生产液流中生物技术产物的收集常通过几步单元操作的组合来完成。在保持产物稳定的理化环境中进行操作时,获得产物回收率、可扩展性、稳健性和生产液流澄清度的最大化,是工艺设计的推动因素。收集的方法取......查看详细>>

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1.2.1 离心

    固液分离理论可以用于预测澄清性能[41]。此理论有助于预测运行条件,但是不适用于非理想化的分离情况,非理想因素包括剪切损伤和干扰沉降。下面所描述的固液分离理论是以连续碟式离心机为例,但是可以加以修订以适用于各种类......查看详细>>

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1.2.2 过滤

    1.2.2.1垂直流过滤一般来说,垂直流过滤(normalflowfiltration,NFF)有两种操作模式。粒子被滤材孔隙或内部截留的过滤模式被称作深层过滤或澄清过滤。而固形物停留在滤材表面并堆积形成逐渐加厚的滤饼的分离方式被称作滤饼过滤。1.2......查看详细>>

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1.3.1 材料

    将高细胞密度的毕氏酵母发酵液300L用纯净水稀释至固形物含量为30%～45%。用于酵母离心研发工作的离心机为WestfaliaCSA-8型碟式离心机,设备参数如表1.3所示。sigma值由供应商提供并由式(1.11)证实。实验室规模研究和固体含量测定所采......查看详细>>

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1.3.2 方法

    表1.5列出了评价离心和过滤性能的检测技术。目的蛋白质的收率采用阴离子交换色谱测定,测定物料、离心滤液、污泥和滤液池中目的蛋白质的浓度并用于计算产物收率。对物料和离心滤液样品进行粒度分布分析,对部分物料和离心滤......查看详细>>

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1.3.3 结果与讨论

    1.3.3.1离心离心是方法1A和1B中常用的单元操作,采用的设备为WestfaliaCSA-8型碟式离心机。研究工作有三个目标:·最终离心滤液池中的固形物含量<1%;·离心步骤的产物收率>85%;·设计一个稳健、易于执行的方案。由于深层过滤的容量......查看详细>>

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1.4 结论

    本章中,我们探讨了离心、深层过滤和微孔过滤分离的理论基础,也评述了这些分离步骤的理论模型。最后,列举了毕氏酵母中表达的一种目的蛋白质的澄清和分离的个案研究,并比较了包含这些单元操作的不同收集方法的性能。表1.1......查看详细>>

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致谢

    感谢AurelieEdwards博士(塔夫斯大学,梅德福,马萨诸塞州)给予的有益的讨论和指导。同时感谢RachaelLewus(弗吉尼亚大学,化学工程系)、SarahHove和KaraLounsbury(均来自MilliporeCorporation)、SharonSquires和CraigRobinson(均来自GEHealthcare)、GlennHiroyasu(PallC......查看详细>>

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术语

    a加速度A面积C浓度d直径D扩散系数DV渗滤体积FB浮力FD阻力g重力h沉降池深度J通量kBoltzmann常数L孔道长度n碟片数目N孔隙数目P压力Q流速r半径rc平均滤饼比阻R阻力s压缩系数sL碟片间液体层厚度S筛分系数t时间ts沉降时间T温度TMP透膜压力......查看详细>>

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参考文献

    1.StephenneJ.ProductioninyeastversusmammaliancellsofthefirstrecombinantDNAhumanvaccineanditsprovedsafety,efficacyandeconomy:HepatitisBvaccine.InMizrahiAandWezelALvan,Eds.,AdvancesinBiotechnologicalProcesses:ViralVaccines,Vol.14.NewYork:AlanR.Liss,1990.2.B......查看详细>>

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