1.4.1 环氧化物水解酶

    在夹子-O脂肪酶底物19(图式1-7)中的产物1,2-二醇20,环氧化物33通过水解也能形成,这就产生了一种简便的高碘酸盐耦合检测方法,用于系列环氧化物的环氧化物水解酶的反应中(图式1-11)[5,32,43]。这些底物的外消旋体很容易制备,即通过伞......查看详细>>

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1.4.2 酰胺酶和蛋白酶

    1,2-氨基醇能被高碘酸钠氧化,生成相应的羰基产物。这个反应比1,2-二醇的要快得多,且与pH无关。该反应可用于设计芳香酮和醛的非挥发性前体,通过添加氰化物形成氰醇,并还原为相应的氨基醇[49]。用1,2-氨基醇的氧化裂解来设计酰胺......查看详细>>

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1.4.3 磷酸酶

    在有机合成方面,人们对磷酸酶兴趣一般,但是在生物技术方面人们对磷酸酶以及植酸酶兴趣日浓。植酸酶是一种能水解植酸(包含多个磷酸基团)的酶。磷酸酶的标准底物是对硝基苯磷酸酯和芳香酚类单磷酸酯。与上面讨论的夹子-O原......查看详细>>

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1.5 拜耳-维立格酶(Baeyer-Villiger酶)

    拜耳-维立格(Baeyer-Villiger)单氧化酶(BVMOs)最近被确认为对手性制备有用的酶,特别是与前手性酮对映体选择性有关。据最近的研究显示,2-芳氧基酮类47～50是这些酶的荧光底物(图式1-15)[40]。氧化裂解的自然选择导致氧原子插入到芳醚的......查看详细>>

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1.6 结论

    对于生物转化,荧光检测是酶工程和酶研究日常操作中不可缺少的工具。荧光底物作为酶分类的常规探针特别有用,常用于日常筛选和活性检查。然而,它们不能替代真正的底物,尤其是在特殊生物转化最优条件选择时。在这种情况下......查看详细>>

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参考文献

    1Reymond,J.L.(2005)EnzymeAssays:HighthroughputScreening,GeneticSelectionandFingerprinting,Wiley-VCHVerlagGmbH,Weiheim.2Ravot,G.,Wahler,D.,Favre-Bulle,O.,Cilia,V.andLefevre,F.(2003)Highthroughputdiscoveryofalcoholdehydrogenasesforindustrialbiocatalysis.Adv......查看详细>>

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2.1 引言

    有机化学中酶催化剂的应用与其固定化技术紧密相关。事实上,有许多酶仅能以固定化形式进行产业化应用。固定化技术有利于拓宽酶的应用范围已得到公认。目前已有许多易于固定化的酶作为生物催化剂成功应用于工业规模生产。......查看详细>>

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2.2.1 范德华相互作用力

    适合通过范德华相互作用力进行固定化的酶大多是脂肪酶。在界面处脂肪酶有活性:许多脂肪酶表现出界面激活[15]。通常认为盖子区域覆盖活性位点的这类脂肪酶,当与亲脂界面接触时,仅能转变为活性构象(盖子打开,活性位点暴露)。......查看详细>>

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2.2.2 氢键

    大多数酶具有亲水表面,常为糖基化的形式。因此,酶可以很容易在极性表面形成氢键。于是,这类酶容易固定于亲水载体上(纤维素、木质素、微晶纤维素、硅藻土、多孔玻璃、黏土、硅胶)[9,12,14]。其中硅藻土载体是一种含硅的藻土......查看详细>>

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2.2.3 离子相互作用力

    最强的静电相互作用是离子相互作用。由于赖氨酸(ε-氨基)、天冬氨酸或谷氨酸(第二个羰基),酶的表面区域含有氨基和羰基[13]。依赖于溶液的pH,这些基团带有电荷并能作用于离子表面。这种类型的固定化技术本质上是基于离子交换......查看详细>>

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