(一)生成盐复合物沉淀法蛋白质等生物大分子和小分子都可以生成盐类复合物沉淀,此法一般可分为3种:与生物分子的酸性功能基团作用(如铜盐、银盐、锌盐、钙盐等);与生物分子的碱性基团作用(如苦味酸盐、苦酮酸盐、单宁酸盐等...[继续阅读]

    透析的原理是指溶质从半透膜的一侧透过膜至另一侧的过程,任何天然的(如腹膜)或人造的半透膜,只要该膜含有使一定大小的溶质通过的孔径,那么溶质分子就可以通过扩散和对流从膜的一侧移动到膜的另一侧。其基本原理是分子的扩...[继续阅读]

    1.透析袋的处理商品透析袋制成管状,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其他生物活性物质有害,用前必须除去。可先用50%乙醇煮沸1h,再依次用50%乙醇、0.01mol/LNaHC...[继续阅读]

    在蛋白质分离纯化过程中,透析主要用于盐析之后的除盐。如在酵母菌表达产物的纯化过程中,在55%硫酸铵饱和沉淀之后,将所得的蛋白质溶液转入透析袋中,将透析袋放入10倍蛋白质溶液体积的无菌PBS中,用磁力搅拌器搅拌以促进液体平...[继续阅读]

    超滤属于膜分离的范畴。膜分离是速率控制的传质过程,具有设备简单、可在室温或低温下操作、无相变、处理效率高和节能等优点,适用于热敏性的蛋白质等生物大分子的分离纯化。超滤可分离分子质量3000～1000000u的可溶性大分子物...[继续阅读]

    膜是超滤的关键器材,为了提高滤液的透过速度,膜表面单位面积上能穿过某种分子的“孔穴”应该多,而孔隙的长度应该小。这样就产生了流速和膜强度之间的矛盾。膜有各种不同的类型和规格,可根据工作的需要来选用。早期的膜是...[继续阅读]

    (一)超滤膜的选择超滤膜的基本性能指标主要有:水通量[cm3/(cm2·h)];截留率[以百分率(%)表示];物理化学稳定性(包括机械强度)等。水通量是指一定压力下单位时间内通过单位膜面积的水量。商品膜的规格型号甚多,在选择时必须注意以...[继续阅读]

    随着超滤技术的不断改进,其已被广泛应用于蛋白质等生物大分子的制备、水处理、医药工业及食品加工工业中。1.蛋白质的纯化在蛋白质的分离纯化技术中,超滤主要用于脱盐、脱水和浓缩等,并具有成本低,操作方便,条件温和,能较好...[继续阅读]

    当把一个带静电荷(Q)的颗粒放入电场时,便有一个电场力(F)作用于其上。F的大小等于质点所带净电荷量(Q)与电场强度(E)的乘积,可用下式表示:F=QE(5-1)由于F的作用,使带点颗粒在电场中向一定方向泳动。质点的前移还要受到阻力(F′)的...[继续阅读]

    电泳的种类繁多,但基本原理一致,按分离原理和有无支持物分别分类如下。(一)按分离的原理分类按分离的原理,可分为区带电泳、移界电泳和稳态电泳。1.区带电泳区带电泳是指有支持介质的电泳,待分离物质在支持介质上分离成若干...[继续阅读]