在细胞中有许多种还原成分(如谷氨酰胺)可防止蛋白质氧化,但是一旦细胞破碎,由于和氧的接触以及稀释作用而引起抗氧化成分的减少,使许多蛋白质被氧化而失去活性。氧化作用可在蛋白质的若干位点上发生,尽管有时可通过减少巯...[继续阅读]

    膜蛋白的提取是蛋白质提取的一个特例。在膜蛋白的提取和纯化过程中常会用到去垢剂,在去垢剂的帮助下使膜蛋白溶解。去垢剂是一种一端亲水一端疏水的两性双极性小分子,可在水中溶解。除了胆酸盐以外,去垢剂分子通常是由线...[继续阅读]

    在提取、纯化蛋白质时,其效果常常受到本身存在的水解酶的影响。在提取蛋白质的同时破碎的细胞可释放出蛋白酶,这些酶在与欲提取的蛋白质接触时,一旦条件适宜,就会发生反应,导致蛋白质分解,使实验失败。因此,在蛋白质提取过...[继续阅读]

    (一)原料的选择蛋白质在分离纯化过程中,能否成功提取其有效成分与原材料的选用有密切关系。原料的选择主要依据所提取的目标蛋白质和实验目的而定。从工业生产角度考虑,理想的原料应含量高、来源丰富、稳定性好、成本低、...[继续阅读]

    在蛋白质的提取分离过程中,常常遇到目标蛋白质存在于细胞内的情况,需要破碎细胞。事实上,除了提取细胞外成分,对细胞内及多细胞生物组织中蛋白质的分离提取均需先将细胞破碎,使其充分释放到溶液中。不同的生物体或同一生物...[继续阅读]

    制备某种生物大分子时,往往需要采用细胞中某一部分为材料;或者为了纯化某一特定细胞器上的生物大分子,通常破碎细胞后,先分离各组分,以防干扰,这对制备一些高难度和高纯度的生物大分子是必要的。细胞器的分离一般采用差速...[继续阅读]

    影响蛋白质水解变性的因素有外在因素和内在因素两方面,外在影响因素主要包括细胞破碎方式、缓冲液pH、温度、离子强度、还原剂和金属离子等;而内在影响因素主要是蛋白水解酶的问题,提取过程中要注意采取一定的保护措施。一...[继续阅读]

    (一)蛋白质提取液的浓缩浓缩是低浓度的溶液除去水或溶剂变为高浓度的溶液的过程。蛋白质产品制备工艺中往往在提取后和结晶前进行浓缩。加热和减压蒸发是最常用的方法,一些分离提纯方法也能起浓缩作用。例如,离子交换法与...[继续阅读]

    动物材料中的蛋白质有些是以可溶的形式存在于体液(如血浆)中,这些蛋白质可以不必经过提取直接进行分离;而有些像角蛋白、胶原蛋白等一些不溶性蛋白,必须先除去一些与实验无关的结缔组织、脂肪组织,再用适当的方法提取后才...[继续阅读]

    植物组织中包含有多种蛋白质,它们在性质上存在着巨大的差异,并且需要特殊的条件才能进行提取和纯化。因此,用单一的提取方案应用于所有植物蛋白质的提取是行不通的。在初始阶段就必须考虑提取比例和可能使用到的相应型号...[继续阅读]